幹細胞研究と治療のジャーナル

概要

恒常的なGFP-UTF1発現はES細胞とEC細胞の分化を阻害する

ラジクマール・P・トゥマー、ローズ・J・ドレンス＝ディエフィス、バート・J・L・エッゲン

胚性幹細胞は自己複製能を持ち、3つの胚性生殖系列のすべての細胞型に分化することができます。未分化胚細胞転写因子1（UTF1）遺伝子はES細胞で高度に発現しており、我々は以前にUTF1がクロマチンと密接に関連しており、多能性マウス胚性幹（ES）細胞および胚性癌（EC）細胞の分化に必要であると報告しました。本研究では、分化におけるその役割をさらに調べるため、GFP-UTF1を恒常的に発現するES細胞株およびEC細胞株を生成しました。GFP-UTF1を恒常的に発現するES細胞およびEC細胞は増殖が抑制され、自己複製には依然としてLIFに依存していました。GFP-UTF1を過剰発現するES細胞の胚様体（EB）分化は、正常な分化と、細胞のサブセットの遅延または不完全な分化の両方を示しました。 GFP-UTF1 は未分化細胞で持続的に発現したが、分化細胞では GFP-UTF1 発現は検出されなかった。GFP-UTF1 を発現する ES 細胞は DMSO に反応して正常に分化したが、EC 細胞の分化は完全に阻害された。GFP -UTF1 を発現する ES 細胞と EC 細胞をRA で処理すると、分化マーカーが誘導され、内因性の UTF1 と GFP-UTF1 タンパク質レベルが減少した。しかし、GFP-UTF1 と UTF1 (ES 細胞内) mRNA は依然として検出された。これは、(GFP-)UTF1 タンパク質の分解が (GFP-)UTF1 mRNA のダウンレギュレーションに先行したことを示しており、RA が UTF1 分解を誘導したことを示唆している。これらのデータをまとめると、UTF1 枯渇と同様に、GFP-UTF1 の過剰発現が ES 細胞と EC 細胞の分化を妨害したことがわかる。