遺伝遺伝学: 現在の研究

概要

3つの異なる蛍光法によるCD34+およびCD45+細胞の計数の比較

ツォンカ・ゴジェヴァルゴヴァ

要約
末梢血およびアフェレーシスサンプル中の幹細胞および白血球の計数は、細胞表面のCD34+およびCD45+タンパク質のバイオマーカー発現を使用して行われた。本研究の目的は、2つの異なる蛍光複合体を使用してアフェレーシスサンプル中の生きた幹細胞および白血球を同時に計数することであった。抗CD34モノクローナル抗体と蛍光染料DR110の複合体は、幹細胞を緑色に染色した。抗CD45モノクローナル抗体と蛍光染料ATTO620の複合体は、白血球を赤色に染色した。抗CD34抗体– DR110および抗CD45抗体– ATTO620の複合体は、カルボジイミド法で調製し、ゲル濾過で精製した。計数は、新しい自動蛍光顕微鏡EasyCounter BCを使用して行った。死細胞は、モノメチンシアニン染料– Sofia Greenで計数した。6つのアフェレーシスサンプルの分析を行った。 EasyCounter BC で得られた結果を、他の 2 つの標準方法 (フローサイトメトリー (Guava easyCyte 8HT) と蛍光顕微鏡法 (Olympus BX51)) で得られた結果と比較しました。EasyCounter BC とフローサイトメーターで得られた細胞数は非常に類似していました。EasyCounter BC で得られた結果の変動係数 (3 ～ 6%) は、フローサイトメーター (5 ～ 8%) や Olympus 顕微鏡 (14 ～ 18%) で得られた結果よりも低くなりました。