細菌学および寄生虫学ジャーナル

概要

感染診断マーカーとしてのトキソプラズマ原虫の可溶性タンパク質と膜結合タンパク質の特性評価

イメン・カンマリ、サミ・ラカール、ブノワ・ウェスターマン、アリア・ベンカーラ、アイーダ・ブラトビン、アラン・ヴァン・ドルセラー、モンセフ・ベン・サイド、クリスティーン・シェーファー＝ライス、ファトマ・サグロウニ

本研究では、1次元ゲル電気泳動、免疫ブロット法、ナノ液体クロマトグラフィー-タンデム質量分析法（nanoLC-MS/MS）を組み合わせて、免疫能のある被験者における後天性トキソプラズマ症の血清診断における信頼性の高い検査法の開発に使用できる、トキソプラズマ・ゴンディのタキゾイトの潜在的な免疫原性タンパク質を同定しました。この目的のために、GT1トキソプラズマ・ゴンディのタキゾイトの可溶性抽出物と膜抽出物を使用した免疫ブロット法を開発し、妊婦から採取した194の陽性血清と100の陰性血清を検査しました。

感度と特異性の点で最も価値があるものとして、可溶性抗原の 5 つのバンド (98 kDa、36 kDa、33 kDa、32 kDa、21 kDa) と膜抗原の 4 つのバンド (41 kDa、35 kDa、32 kDa、30 kDa) が選択されました。これらのバンドのうち、可溶性抗原の 2 つのバンド (33 kDa と 32 kDa) と膜抗原の 2 つのバンド (32 kDa と 30 kDa) のみが 90% 以上の特異性を示しました。

質量分析とバイオインフォマティクス解析の結果、トキソプラズマ症の血清診断の潜在的マーカーとして 7 つのタンパク質が特定されました。これらのタンパク質は、SRS34A、GRA7、GRA1、DG32、MIC5、ROP5、およびトキソフィリンです。これらのタンパク質は、T. gondii の VEG 株と ME49 株の両方のタンパク質と 86% ～ 100% の相同性を示し、Hammondia hammondiとは 58% ～ 87% の相同性を示しました。これらのタンパク質は、トキソプラズマ症の迅速な診断に使用できる免疫クロマトグラフィー検査の開発や、通常の技術で曖昧な結果が得られた場合の確認検査として魅力的な候補と考えられます。