幹細胞研究と治療のジャーナル

概要

新規異種移植材料の生体適合性評価基準：残存核酸およびα-Galエピトープの分布と定量

ナソ・フィリッポ、アギアリ・パオラ、イオプ・ラウラ、スピナ・ミケーレ、ジェローザ・ジーノ

目的: 市販の脱細胞化異種スキャフォールドは現在、病変組織の治癒に使用されています。奇妙なことに、α-Gal エピトープなどの異種細胞物質の除去の評価がなくても、その使用が許可されています。さらに、脱細胞化手順は、核酸残留物に関連する石灰化の可能性の除去を証明するために監視されていません。現在行われているグルタルアルデヒドによる処理では、移植された異種組織の完全な免疫寛容を付与できず、特にα-Gal エピトープ (異種移植の成功に対する主な障害) に対する免疫原性は軽減されますが、完全に除去されることはありません。最近、私たちのグループは、異種組織の生体適合性特性の評価に焦点を当てた研究を広範囲に報告しています。このレポートでは、さまざまな応用分野で非常に有望な前臨床/臨床結果を示している新しい異種組織に対してこの調査と核酸検出を行っています。方法: α-Gal の定量は、当研究チームが以前に開発し特許を取得した ELISA 試験によって実施しました。この試験では、モノクローナル抗α-Gal 抗体 M86 を使用しています。異種エピトープと核酸残基の両方の視覚的分布を調べるために、免疫蛍光分析を実施しました。最後に、総 DNA 定量には市販のキットを採用しました。結果: 調査した生体材料間で α-Gal エピトープの量と分布が異なることが判明しましたが、メーカーによって無細胞として提供された組織であっても、核酸残留物の存在が共通の特徴であることが明らかになりました。結論: スキャフォールド内の異種エピトープ、洗剤、核酸材料の残留含有量について前臨床レベルで行われた定量評価が不十分であったため、期待外れで悲惨な結果となりました。主要な異種決定因子（α-ガラクトシダーゼ）と石灰化を起こしやすい核酸残留物の完全な除去を含む安全性パラメータが特定され、製造慣行に導入されない限り、これらの劇的な事故が再発するリスクは非常に高いままです。