微生物および生化学技術ジャーナル

概要

サルモネラ菌および大腸菌に汚染された食品の検出のための抗LPSテストストリップ

アルヴィン・ワン、ガブリエル・モリーナ、ビクター・プリマ、ケビン・KW・ワン

大腸菌やサルモネラ菌などの腸内細菌は、食中毒症状の一因となるエンドトキシン、すなわちリポ多糖類（LPS）を放出します。私たちは、LPS は簡単なストリップ テストで検出でき、それによって食品中の腸内細菌の存在を検出できると仮定しています。ここでは、新しい抗 LPS 検出ストリップ テストの開発について説明します。一端に吸収性ポリ（フッ化ビニリデン）膜を接着した柔軟なポリスチレン テスト ストリップを、食品または細菌源のさまざまな希釈度にさらします。次に、一次抗 LPS 抗体、ビオチン化二次抗体、およびストレプトアビジン結合酵素アルカリホスファターゼで順次インキュベーションします。次に、テスト ストリップを基質 5-ブロモ-4-クロロ-3-インドリル リン酸/ニトロブルー テトラゾリウムで現像します。したがって、紫色の沈殿物の存在は、LPS および腸内細菌の存在を示します。色の強度または暗さは濃度測定法で定量化され、LPS 標準曲線と比較されました。テスト ストリップ アッセイは、25 ng/mL という低濃度の精製 LPS を容易に検出できることが示されました。さらに、抗 LPS テスト ストリップ アッセイは、生きた大腸菌によって培養培地に放出された LPS を高感度に検出し、定量化できます。最後に、3 つの食品グループ (イチゴのスライス、ほうれん草の葉、牛ひき肉) に、室温で 2 つの時点にわたって大腸菌を接種し、各食品調理後のすすぎ水を抗 LPS テスト ストリップ アッセイにかけました。3 つの食品グループすべてについて、テスト ストリップ アッセイは、8 時間および 24 時間の細菌汚染を、それぞれの汚染されていないコントロールよりも容易に検出し、定量化できます。結論として、一般的な食品の腸内細菌汚染を容易に検出するための、シンプルなプロトタイプの抗 LPS ストリップ テストが開発されました。