細菌学および寄生虫学ジャーナル

概要

逆転写ループ媒介等温増幅法を用いたヒトジカウイルスの簡単な視覚検出法

Yang Li1、2、Zhenzhou Wan3、Yi Zhou2、4、Xia Jin5、Haifeng Shi1*、Chiyu Zhang 2*

ジカウイルス（ZIKV）は、新興の蚊媒介病原体であり、フラビウイルス科、フラビウイルス属に属します。ZIKV感染は、小頭症や男性不妊症と関連しています。ジカ感染の監視は、人間の生殖保健とウイルス拡散の制御にとって重要です。中国や他の東南アジア諸国では、ZIKV検出のための迅速かつ高感度なアッセイの開発が緊急に必要とされています。ここでは、ZIKV検出用のワンステップ、シングルチューブ逆転写ループ介在等温増幅（RT-LAMP）アッセイを開発しました。このアッセイの検出限界（LOD）は、25μl反応あたりジカRNA 88コピーであり、テンプレート入力がLODを超える場合は20分以内に完了できます。さらに、高い特異性と良好な再現性を示します。重要なことに、HNBまたはカルセインを使用すると、比色変化によって結果を視覚化できます。アッセイの実現可能性を評価するために、20 個の細胞培養上清と 3 つの尿サンプルを使用して、RT-LAMP アッセイとより変換的な RT-qPCR の比較を実施しました。ZIKV RT-LAMP は、RT-qPCR と完全に一致する検出結果を示しました。これらの結果は、新しく開発された ZIKV RT-LAMP がシンプルで迅速であり、特にリソースが限られた地域での ZIKV 監視に適していることを示しています。