植物病理学および微生物学ジャーナル

概要

トマト果実からのペピーノモザイクウイルスRNAの分離のための簡単、迅速、効率的な方法

アマル・ソウイリ、ムスタファ・ゼムザミ、ハディージャ・カタビー、ハヤット・ラーティリス、サイード・アムザジ、ムーレイ・ムスタファ・エナジ

植物におけるRNAウイルス病原体の分子検出における主な懸念は、抽出されたRNAの品質を良好に保つことです。多糖類が豊富な組織と少ない組織、およびその他の扱いにくい植物からRNAを分離する方法はさまざまです。しかし、時間と試薬を消費する方法や危険な化学物質を使用する方法は、特にトマト果実からウイルスRNAを分離するなどの特定の目的に必要でない場合は、やや面倒で問題があります。これが本論文の目的です。ペピーノモザイクウイルス（PepMV）の場合、RNA抽出および精製ステップなしでトマト果実からウイルスRNAを調製する、代替のシンプルで迅速な方法について説明します。

この方法では、機械的処理と水中への懸濁を採用しています。得られたRNAの品質は分光測定で判断し、RT-PCRアッセイで検証しました。使用したプロトコルを通常のTRIzol法と比較しました。結果は、提案された方法を使用して得られたRNAの収量と品質がTRIzol法と比較して効率的で収量が高いことを示しました。さらに、開発された方法により、 RT-PCRでPepMV予測バンドを高感度かつ再現性のある方法で検出できました。したがって、トマト果実からのPepMVの分子検出は、面倒なRNA分離なしで日常的に行うことができます。また、高価な市販キットや有毒化学物質を使用する方法と比較して、トマト作物に感染する他のRNAウイルスの診断がより簡単かつ短時間で行えます。最後に、説明した確立された方法は、世界中のトマト作物の植物検疫および認証プログラムの戦略に効果的に貢献します。