微生物および生化学技術ジャーナル

概要

動物および食品サンプル中のトキソプラズマ原虫検出のための高感度ネステッドPCR

マリア・ヴィターレ、パオラ・ガッルッツォ、ヴィットリア・クーロ、カタリナ・ゴズジク、ドメニコ・スキラッチ、ヴィンチェンツォ・ディ・マルコ・ロ・プレスティ

トキソプラズマ・ゴンディは、世界中で食品や水を介して感染する主要な寄生虫です。多くの温血動物の組織や肉のサンプルには、慢性トキソプラズマ症による組織嚢胞が含まれている可能性があります。寄生虫の終宿主である感染した猫の排泄物から排出される寄生虫のオーシストによって、水や野菜が汚染される可能性があります。

トキソプラズマ ゴンディ検出用の高感度 PCR について説明します。最初のステップでは、近縁のトキソプラズマ ゴンディとネオスポラ カニナムの 28S rDNA と 18S rDNA の間の領域を増幅します。RFLP 分析により、形態的に同一の 2 つの寄生虫の DNA を区別しました。これまでのところ、ネオスポラ カニナムはヒトへの感染には関与していませんが、牛の流産の主原因であるため、動物の健康にとって重要です。

ネストPCRは、T. gondii寄生虫DNAを添加した豚ソーセージサンプルの希釈アッセイに使用されました。分析の結果、最大200fg（2つの寄生虫に相当する）までしか検出できないことが示されました。T. gondiiの同様の検出限界はリアルタイムPCRでも得られますが、リアルタイム法には特別な消耗品と高価な機器が必要です。